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驻马店市猪群主要疫病流行情况调查

为了解当前驻马店市猪群主要疫病流行情况,掌握猪群主要发病及死亡原因,定期从市内3 个无害化处理厂采集病死动物组织样品,进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、口蹄疫、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病2 型、猪圆环病毒病3型、猪细小病毒病、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、副猪嗜血杆菌病、弓形虫病共计11 种病的病原核酸检测,现将具体情况报告如下.

一、材料与方法

1. 样品的采集.自2017 年5月~ 7 月,每月每厂随机按批次采集不少于5 份病死猪的脾脏、肺脏、淋巴结、脑、扁桃体、胸腹腔积液等组织样品,标记清楚,并填写样品采集登记表, 共采集48 份组织样品.

2. 样品的处理.每份样品中将不同组织按1 ∶ 1 的体积比例剪取后放入2 ml 离心管中,加入适量生理盐水, 在高通量组织研磨仪中研磨后-20℃保存备用.

3. 仪器与耗材.移液器由德国Eppendorf 公司生产;实时荧光定量PCR 仪及全自动核酸提取仪由西安天隆科技有限公司生产;高通量组织研磨仪由德国QIGEN 公司生产;无酶Tip 头及PCR 管由美国Axygen公司生产.

4. 试剂.猪瘟病毒通用型实时荧光RT-PCR 检测试剂盒、口蹄疫病毒通用型实时荧光RT-PCR 检测试剂盒、猪伪狂犬病毒实时荧光PCR 检测试剂盒、猪细小病毒实时荧光PCR 检测试剂盒、弓形虫实时荧光PCR 检测试剂盒、猪圆环病毒2 型和3 型双重实时荧光PCR 检测试剂盒均由北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产;猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR 检测试剂盒、猪流行性腹泻病毒实时荧光RT-PCR 检测试剂盒、猪传染性胃肠炎病毒实时荧光RT-PCR 检测试剂盒、副猪嗜血杆菌实时荧光PCR 检测试剂盒均由洛阳莱普生信息科技有限公司生产.

5. 检测方法.具体操作步骤按照试剂盒说明书进行.

6. 结果判定.猪瘟、口蹄疫、猪细小病毒核酸Ct 值≤ 30 为阳性,Ct 值≥ 37 或无Ct 值为阴性,30<Ct 值<37 为可疑,复检仍是可疑可判为阳性;猪弓形虫核酸Ct 值≤ 30 为阳性,无Ct 值为阴性;猪伪狂犬、猪圆环病毒(2 型和3 型)Ct 值≤ 30 为阳性,Ct 值>35 或无Ct 值为阴性,30<Ct 值≤ 35 为可疑,复检仍是可疑可判为阳性;猪传染性胃肠炎病毒核酸Ct 值≤ 30 为阳性,无Ct 值为阴性;猪流行性腹泻病毒核酸Ct 值≤ 30 为阳性,无Ct 值为阴性;副猪嗜血杆菌核酸Ct 值≤ 36为阳性,36<Ct 值<38 为可疑,复检仍是可疑可判为阳性,无Ct 值为阴性;猪蓝耳病病毒核酸Ct 值≤ 35为阳性,35<Ct 值≤ 38 为可疑,复检仍是可疑可判为阳性,Ct 值>38或无Ct 值为阴性.

二、结果

经过对48 份组织样品进行病原核酸检测,结果显示:猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪细小病毒病、猪流行性腹泻、副猪嗜血杆菌病病原核酸检测呈阳性,猪瘟、口蹄疫、猪传染性胃肠炎、弓形虫病原核酸检测呈阴性.详情如表1 所示.

三、分析与小结

1. 根据检测结果,说明近期我市猪只病死原因主要由猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪细小病毒病、猪流行性腹泻、副猪嗜血杆菌病引起.

2. 猪圆环病毒3 型是近期才由国外率先报道出的新型病毒毒株,根据检测结果,48 份组织样品中有2 份呈圆环病毒3 型核酸阳性,这也表明我市已有该种病毒毒株的存在,实际生产中应加强防控.

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