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二极管阵列检测器在食品检测中的应用

摘 要:目的:通过HPLC 法对食品添加剂苯甲酸、山梨酸的检验,探讨二极管阵列检测器在食品营养学中的应用范围.方法: 采用Agilent C18(150*4.6mm,5μm)色谱柱,用SPD-M20A 二极管阵列检测器检验,检测波长:230nm.以甲醇- 乙酸铵溶液(5:95)为流动相,柱温25.0℃,流速1.00mL/min.结果:疑似峰为苯甲酸峰,且在225nm 处有最大吸收.结论:二极管阵列检测器能够准确甄别目标峰,在食品检验领域具有重要的应用价值.

关键词:食品检测;二极管阵列检测器;苯甲酸;甄别

适量的食品添加剂为防腐或者加工工艺所需,并且还能够赋予食品色、香、味.超量使用食品添加剂会损害消费者的身体机能,合理膳食不但要关注营养组成,更要关注食品中的添加剂是否过量.大多数食品成分复杂,待检物质为微量甚至痕量,如果在食品前处理过程中处理不当,极易造成分析过程中,杂质成分对待测物质的干扰.本实验采用HPLC 法,运用二极管阵列检测器对疑似出现的苯甲酸峰进行了确定,对熟肉中可能含有的食品添加剂苯甲酸、山梨酸两种成分同时进行含量测定.

仪器与试药

仪器LC-20AT 型高效液相色谱仪( 日本岛津, 包括SPD-M20A 检测器,LCSolution 工作站);KT-250W型超声波清洗器(济宁科特超声电子有限责任公司);AB104-N 型电子天平(梅特勒-- 托尼多仪器( 上海) 有限公司);TG16-WS 型高速台式离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)

试药 苯甲酸标准溶液(GBW(E)100006,批号:11003,1.00mg /mL) 和山梨酸标准溶液(GBW(E)100007,批号:12001,1.00mg /mL)均购自中国计量科学研究院;甲醇(色谱纯);水(超纯水);其余均为分析纯.

方法与结果

色谱条件 色谱柱:Agilent C18 柱,150*4.6mm,5μm ; 流动相: 甲醇- 乙酸铵溶液(5:95); 柱温:25.0℃ ;流速:1.00mL/min ;检测波长:230nm.对照品溶液的制备 分别取苯甲酸、山梨酸标准溶液适量,用水将其稀释成苯甲酸、山梨酸含量分别为0.00mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08 mg/mL、0.16mg/mL、0.32mg/mL 的混合标准使用液.

样品溶液的制备 称取粉碎均匀样品(卤猪耳,本地餐馆)于小烧杯中,用20mL 水分数次清洗小烧杯,将样品移入25mL 容量瓶中,超声振荡提取10min,取出后加2mL 亚铁溶液,摇匀,再加入2mL 乙酸锌溶液,摇匀,用水定容至刻度.移入离心管中,4000r/min 离心5min,吸出上清液,用微孔滤膜(0.45μm,水相)过滤,即得.

标准曲线的制作 将梯度浓度的标准混合使用液精密进样10μL, 分别以苯甲酸和山梨酸浓度为横坐标,以响应的峰面积为纵坐标,计算得苯甲酸线性回归方程:Y等于4749431303.52X(R2等于1), 山梨酸线性回归方程:Y等于7081586158.65X(R2等于1).范围内线性关系良好.0.02mg/mL 浓度色谱图见图1.

精密度试验 将0.02mg/mL 的混合标准溶液连续进样5 次,每次10μL,测定,结果苯甲酸峰面积相对标准偏差RSD等于0.28%,山梨酸峰面积相对标准偏差RSD等于0.36%,表明仪器精密度良好.

最低检出限 将0.02mg/mL 的混合标准溶液稀释后测定,在信噪比为3 时测得苯甲酸检出限为2ng.

目标峰的确定 分别取供试液及0.02mg/mL 的混合标准溶液,进样10μL,用二极管阵列检测器进行全波段扫描,扫描结果见图2.

样品的含量测定 精密称取样品2 份,按“2.3”项下方法制备供试液,每份供试液分别进样2 次,进样10μL,将数据代入相应标准曲线,测定结果见表1,分析图谱见图4.

讨论

超声提取时间的优化 本实验对超声的时间进行了优选,试验中对样品超声处理5、10、15 分钟的提取效果进行了考察,结果超声5 分钟提取不完全,而超声10 分钟和15 分钟结果相差不大,因此在样品前处理过程中,超声处理10 分钟最佳.

目标物质的甄别 食品检验过程中,在定位峰的保留时间附近,经常会出现其它的峰,难以判定究竟是杂质峰还是待测物质峰.试验中通过标准溶液定位可知苯甲酸保留时间5.527min,而供试品溶液在5.573min 有峰出现,鉴于保留时间有细微差别,难以通过HPLC 色谱图确定待测物质是否存在.本试验运用二极管阵列检测器的全波段扫描功能,在180nm 至800nm 范围内,分别对标准溶液5.527min 出峰物质和供试品溶液5.573min 出峰物质进行扫描,结果显示两者在波段范围内吸收趋势一致,并且均在225nm 处有最大吸收,表明两者同为苯甲酸.

检测波长的选择 国家标准(食品卫生检验方法理化部分㈠)推荐苯甲酸的检测波长为230nm.通过二极管阵列全波段扫描发现,苯甲酸在225nm 处有最大吸收,食品检验过程中,是否应该根据实际情况选择最佳吸收波长进行检测,尚需更深入的研究.

参考文献

[1] 中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法理化部分㈠[S].2012 年版.253-254

吕文超 李佳文

食品检测论文范文结:

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